安徽医科大学第一附属医院检验科
作业指导书 文件编号: AYL-S7-328 版本:3.0 页码: 第1页 共4页 编写者：沈继录 文件发放范围：微生物组 审核者： 批准人： 生效日期：2012.1.1 文件年度审核 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 志贺菌属检验标准操作规程
1．概述
志贺菌属分为4个群（种）：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。 2. 标本类型 粪便、肛拭子标本。 3. 鉴定
3.1 形态与染色 革兰阴性杆菌。
3.2 培养特性 在麦康凯琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成无色透明的小菌落。在SS琼脂平板上呈无色透明或半透明的较小菌落。
3.3 生化反应 氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵乳糖、蔗糖，三糖铁琼脂（TSI）为K/A，甲基红和盐还原试验阳性，动力、VP、枸橼酸盐、脲酶、H2S和醋酸盐试验均阴性。 3.4 鉴别要点
3.4.1 本菌属特征 在SS平板上无色透明或半透明的小菌落，TSI为K/A，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，无动力，脲酶、H2S试验均阴性。符合上述特征者，可通过血清凝集试验作出诊断。如血清不凝集，应进一步鉴别。
3.4.2志贺菌属种间鉴别 见表1
表1 志贺菌属种间鉴别的关键性试验（阳性%）
菌 名 福氏志贺菌 痢疾志贺菌 鲍氏志贺菌 宋内志贺菌 注：*为迟发反应。
半乳糖苷酶 1 30 10 90 鸟氨酸 0 0 2 98 甘露醇 95 0 97 99 乳糖 1 0 1 2*
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作业指导书 文件编号: AYL-S7-328 版本:3.0 页码: 第2页 共4页 3.5 操作步骤
3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。参见《三糖铁试验标准操作规程》。 3.5.2 血清学鉴定 参见《志贺菌血清学检测标准操作规程》。
3.5.3 鉴定 从SS琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4. 药敏
参见《药物敏感性试验标准操作规程》。 5. 质量控制
参见《质量管理程序》。 6. 检验结果解释与分析
一般志贺菌不进入血液，所以只取粪便和肛拭子标本作培养。本菌大多数菌株对氯霉素、链霉素、氨苄西林耐药，多数菌株对卡那霉素、庆大霉素敏感。 7. 临床意义
志贺菌属引起细菌性痢疾，表现为腹痛、发热、大量水样便，1-2日后转为少量腹泻（有里急后重现象），便中含有多量的血、黏液和白细胞。临床主要有两种类型：急性细菌性痢疾，又分典型和不典型两种，后者症状不典型，容易造成误诊和漏诊；慢性细菌性痢疾，常因急性菌痢治疗不彻底，造成反复发作、迁延不愈，病程超过2个月以上视为慢性菌痢。
8. 鉴定流程
仪器或手工细菌鉴定 初步鉴定：TSI，KIA/MIU 分离培养（SS、MAC） 增菌培养（GN肉汤） 粪便、尿、残余食物 菌落观察：SS平板上呈无色透明或半透明较小菌落 血清鉴定 志贺菌属
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作业指导书 文件编号: AYL-S7-328 版本:3.0 页码: 第3页 共4页 参考文献
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[2] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007
[3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006 [4] Murray PR. Manual of Cinical Microbilogy. 9th ed.Washington:ASM Press,2007 [5] ISO 151：2007医学实验室-质量和能力认可准则. 2007
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作业指导书 文件编号: AYL-S7-328 版本:3.0 页码: 第4页 共4页 文件更改记录
修改后版本 更改概述 批准人 生效日期 3.0 增加“文件更改记录” 2012.1.1