骨髓和外周血干细胞移植患者巨细胞病毒感染的检测研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 哈尔滨医药２００８年第２８卷第２期　・３・　・论著・　骨髓和外周血干细胞移植患者巨细胞病毒感染的检测研究　刘　萍，张坚磊，穆红　（天津市第一中心医院，天津３００１９２）　摘要　目的对骨髓移植和外周血干细胞移植患者巨细胞病毒感染的检测研究。方法分别对２９例骨髓移植和６９例　外周血干细胞移植患者采用ＥＬＩＳＡ法检测血中ＣＭＶ—ＩｇＭ，ＦＱ—ＰＣＲ方法检测血液和尿液中ＣＭＶ—ＤＮＡ。结果　骨髓移植　患者血中ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率为３１．０３４％（９／２９），ＣＭＶ—ＤＮＡ载量均值为１．２４×１０　拷贝／ｍｌ。尿液ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率为　４８．２８％（１４／２９），阳性标本ＣＭＶ—ＤＮＡ载量均值为１．２７×１０。拷贝／ｍｌ。外周血干细胞移植患者血浆ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率为　４０．５８％（２８／６９），阳性标本ＣＭＶ—ＤＮＡ载量均值为２．３３×１０　拷贝／ｍｌ。尿液ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率为５２．１７％（３６／６９），阳性　标本ＣＭＶ—ＤＮＡ载量均值为１．３２×１０’拷贝／ｍｌ。结论ＦＱ—ＰＣＲ方法定量检测ＨＣＭＶ，在ＣＭＶ感染的诊断、治疗和疗效　观察有重要作用。　关键词骨髓移植；外周血干细胞移植；巨细胞病毒；ＦＱ—ＰＣＲ　［中图分类号］ＲＳ１１　［文献标识码］Ａ　学科分类代码：３１０．４１　文章编码：１００１—８１３１（２０ｏ８）０２—０ｏ０３—０３　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ＬＩＵ　Ｐｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｊｉａｎｌｅｉ，ＭＵ　Ｈｏｎｇ　（Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｆｉｒｓｔ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｉａｎｊｉｎ　３００１９２，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ　ｔｈｅ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｏｆ　ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｂｏｎｅ　ｍａｒ－　ｒｏｗ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＣＭＶ—ＤＮＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ　ａｎｄ　ｕｒｉｎｅ　ｏｆ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＦＱ—ＰＣＲ，ａｎｄ　ａｎｔｉ—ＣＭＶ　ＩｇＭ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＥＬＩＳＡ　ｉｎ　２９　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｒｔａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　６９　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　９　ｃａｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ　ａｎｄ　１４　ｃａｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｕｒｉｎｅ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ＣＭＶ—ＤＮＡ　Ｌ￣ｏｓｉｔｉｖｅ，，ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｉｓ　３１．０３％ａｎｄ　４８．２８％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｃｏｐｙ　ｗａｓ　．２４×１０５ｃｏｐｙｓ／ｍｌ　ａｎｄ　１．２７×１０６ｃｏｐｙｓ／ｍｌ　ｒｅｓｐｅｃ—　ｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｗａｓ　ｓａｍｅ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒｎａｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＦＱ—ＰＣＲ　ｃａｎ　ｂｅ　ｗｉｄｅｌｙ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＭＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｔｒａｎｇｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ；ＦＱ—　ＰＣＲ　巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染是免疫功能低下者常见的机会　胞白血病（ＡＬＬ）２４例。用ＦＱ—ＰＣＲ检测测定患者静脉血　感染。器官移植或骨髓移植者因接受大剂量免疫抑制剂或　和尿液中的ＣＭＶ—ＤＮＡ，同时用传统的ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶ—　肿瘤化疗等，机体细胞免疫功能降低，可引起体内潜伏的　ＩｇＭ进行比较。　ＣＭＶ病毒激活，可导致严重的ＣＭＶ病如间质性肺痰、肝炎、　１．２方法　器官移植物损伤等，甚至可引起死亡。本研究对骨髓移植和　１．２．１　ＦＱ—ＰＣＲ检测：引物和试剂由中山大学达安基因诊　外周血干细胞移植血液病人的ＨＣＭＶ感染进行检测分析。　断中心提供。引物序列为Ｆｏｒｗａｒｄ　Ｐｒｉｍｅｒ：５’一ＧＣＴＡＡＣ—　１对象与方法　ＴＡＴＧＣＡＧＡＧＣＡＴＧＴＡ一３’．Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｐｒｉｍｅｒ：５’一ＧＣＴＧＡＧＴ－　１．１对象：本院血液科收治的２９例行骨髓移植患者，男１６　ＴＣ　ｒＧＧＴＡＡＡＧＡＡＣ一３’。ＴａｑＭａｎ　Ｐｒｏｂｅ：５’一ＣＴＡＣＡＴｒＧ－　例，女１２例，年龄１５～４６岁，平均年龄（２７．１±５．２）岁。临　ＴＡＣＣＣＧＡＧＧＡＴＡＡＧＣＧ一３’。采用ＡＢＩ７３００自动荧光ＰＣＲ　床诊断漫性粒细胞白血病（ＣＭＬ）９例，急性髓细胞白血病　仪检测。样本ＤＮＡ的提取按试剂盒说明书进行。扩增条件　（ＡＭＬ）８例，急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１２例。６９例行外　为９３℃２ｍｉｎ预变性，９３ｏＣ　４５ｓ，５５℃６０ｓ，１０个循环，９３℃　周血干细胞移植患者，男４６例，女２３例；年龄１１—５２岁，平　３０ｓ，５５￣Ｃ　４５ｓ，３０个循环。每次试验按试剂盒提供的定量阳　均年龄（３４．７±４．２）岁。临床诊断慢性粒细胞白血病　性质控标准品做质控和标准曲线，同时设置阴性、空白对照。　（ＣＭＬ）２７例，慢性髓细胞白血病（ＡＭＬ）１８例，急性淋巴细　反应结束后，由电脑自动分析计算定量结果。　维普资讯 http://www.cqvip.com ・４・　哈尔滨医药２００８年第２８卷第２期　１．２．２酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）：采用美国ｂｉｏ—ｃｈｅｃｋ　血浆ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率与尿液ＣＭＶ—ＤＡＮＡ阳性率比较　有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　免疫诊断试剂盒，操作与结果判断严格按说明书进行。　１．３统计学处理：数据用ＳＰＳＳ１５．０统计软件分析，各指标　２９例行骨髓移植患者中ｌ４例尿液ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性，　阳性率为４８．２８％（１４／２９）。阳性标本ＣＭＶ—ＤＮＡ在７．４３　Ｘ　１０　～８．１６　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ之间，平均为１．２７　Ｘ　１０　拷贝／　组间差异性检验用ｘ２检验进行统计学分析，Ｐ＜０，０５为差异　有统计学意义。　２结果　Ⅱｌｌ。其中在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有２例，在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范　围内有７例，在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有４例。６９例行外周血　干细胞移植患者中３６例尿液ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性，阳性率为　５２．１７％（３６／６９）。阳性标本ＣＭＶ—ＤＮＡ在６．０６　Ｘ１０　～１．４９　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ之间，平均为１．３２　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ。其中在　２．１　ＦＱ—ＰＣＲ检测情况ＣＭＶ的定量阳性质控标准品经　ＦＱ—ＰＣＲ，以起始拷贝数的对数为横坐标，以Ｃｔ为纵坐标，　得到一条标准曲线，线性相关系数ｒ＞０．９９７，以ＣＭＶ—ＤＮＡ　＞１．Ｏ０　Ｘ１０　拷贝／ｍｌ为阳性。　２９例行骨髓移植患者中９例血浆ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性，阳　１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有１１例，在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有１４　性率为３１．０３％（９／２９）。阳性标本ＣＭＶ—ＤＮＡ在１．２５　Ｘ　例，在１Ｏ’拷贝／ｍｌ范围内有８例，在１Ｏ。拷贝／ｍｌ范围内有　１Ｏ　～４．１１　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ之间，平均为１．２４　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ。　１例。尿液ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率与血浆ＣＭＶ—ＤＡＮＡ阳性率　其中在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有２例，在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内　比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　有５例，在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有２例。６９例行外周血干细　２．２　ＥＬＩＳＡ检测结果：２９例行骨髓移植患者中５例ｃＭＶ—　胞移植患者中２８例血浆ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性，阳性率为４Ｏ．　ＩｇＭ阳性，阳性率为１７．２４％（５／２９）。６９例行外周血干细胞　５８％（２８／６９）。阳性标本ＣＭＶ—ＤＮＡ在２．４９　Ｘ１０　一１．２６　Ｘ　移植患者中１４例ＣＭＶ—ＩｇＭ阳性，阳性率为２Ｏ．２９％（１４／　１Ｏ　拷贝／ｍｌ之间，平均为２．３３　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ。其中在１Ｏ　６９）。骨髓移植和外周血干细胞移植组ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率　拷贝／ｍｌ范围内有３例，在１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有１４例，在　与ＣＭＶ—ＩｇＭ阳性率比较分别有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　１Ｏ　拷贝／ｍｌ范围内有１Ｏ例，在１０６拷贝／ｍｌ范围内有１例。　（见表１）　表１　ＣＭＶ—ＤＮＡ和ＣＭＶ—ＩｇＭ阳性率的比较　｝ＣＭＶ—ＤＮＡ组与ＣＭＶ—ＩｇＭ组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５），　△尿液ＣＭｖ—ＤＮＡ组与血浆ＣＭＶ—ＤＡＮＡ组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５）　３讨论　药的重要方法，ＦＱ—ＰＣＲ可以从拷贝数量直观了解ＣＭＶ感　巨细胞病毒（ＣＭＶ）属于疱疹病毒８亚类科，是一种潜　染程度，从分子水平上检测ＣＭＶ感染情况及抗病毒治疗效　伏性病毒。Ｃ！ＭＶ感染是免疫功能低下者常见的机会感染。　果。应用ＦＱ—ＰＣＲ技术可以对病毒进行精确的定量分析，　器官移植或骨髓移植者因接受大剂量免疫抑制剂或肿瘤化　通过病毒负荷判断感染的严重程度，指导临床用药和疗效观　疗等，机体细胞免疫功能降低，可引起体内潜伏的ＣＭＶ病毒　察　］。　激活，可导致严重的ＣＭＶ病如间质性肺痰、肝炎、器官移植　本研究显示骨髓移植患者血清抗ＣＭＶ—ＩｇＭ的阳性率　物损伤等，甚至可引起死亡Ｌ１　Ｊ。如移植后发生ＣＭＶ肺炎　为１７．２４％，血中ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率为３１．Ｏ３％，而尿中　则死亡率可达８０％～９０％。国内文献　报道造血干细胞　ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率更高达为４８．２８％，分别与ＣＭＶ—ＩｇＭ的　移植后ＨＣＭＶ感染引起的间质性肺炎（ＩＰ）发病率可达　阳性率比较均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。外周血干细胞移　３０％，病死率可达８０％以上，国外文献　‘　也报道骨髓移植　植结果与骨髓移植结果相同。这一结果表明血清抗ＣＭＶ—　患者并发ＣＭＶ活动性感染并导致间质性肺炎，其病死率高　ＩｇＭ对诊断ＣＭＶ感染有一定的局限性，ＦＱ—ＰＣＲ对高浓度　达８７％，因此监控ＨＣＭＶ感染的发生，及时应用抗病毒药物　ＣＭＶ的检出可以有效显示体内病毒的活跃程度的。　预防或治疗对于控制相关疾病的发生意义重大。　同时本研究还显示尿液ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率明显高于血　既往ＨＣＭＶ感染的诊断主要依据ＥＬＩＳＡ法检测ＣＭＶ　浆ＣＭＶ—ＤＮＡ阳性率（Ｐ＜０．０５），尿液ＣＭＶ病毒载量也高　特异性ＩｇＭ抗体，该法可用于免疫功能正常的ＨＣＭＶ活动　于血浆的病毒载量，其平均值分别为１．２７　Ｘ　１０　拷贝／ｍｌ和　性感染或ＨＣＭＶ病的诊断，但其阳性率低。而且器官移植、　１．３２　Ｘ　１０’拷贝／ｍｌ，这是因为ＣＭＶ易侵袭侵犯管道上皮细　血液病患者的治疗多应用免疫制剂，这类病人的抗体水平低　胞，尤其是肾脏及肝胆系统。ＣＭＶ在肾小球细胞和肾小管　下或抗体延迟出现．检测不到ＨＣＭＶ而造成ＨＣＭＶ感染假　上皮细胞内复制，经尿液排出，因此当患者体内ＣＭＶ处于活　阴性。本研究中，骨髓核外周血干细胞移植患者ＣＭＶ—ＩｇＭ　跃期并大量复制时，尿液中能检测到高浓度的ＣＭＶ—ＤＮＡ。　的阳性率仅分另０为１７．２４％和２０．２９％，表明ＣＭＶ—ＩｇＭ抗　更因为尿液较血液来源简单方便，其检测更具有临床意义。　体检测并不是临床诊断ＨＣＭＶ感染的最有效指标。　由此可见，ＦＱ—ＰＣＲ方法可快速、灵敏、特异、定量检测　随着新技术的发展，巨细胞病毒感染的检测手段日新月　ＣＭＶ，可以早期诊断ＣＭＶ的感染，尽早治疗。另外，在治疗　异，ＦＱ～ＰＣＲ已经成为检测活动性ＣＭＶ感染和指导临床用　中对ＣＭＶ病毒载量的动态观察还可以观察疗效。　维普资讯 http://www.cqvip.com 哈尔滨医药２００８年第２８卷第２期　・５・　长期异常应力下家兔颈肌和颈问盘细胞凋亡的观察　武震，王丽莉，程凤羽，吕键飞，王　鑫，杨伟华，李　凯　（黑龙江总队医院，黑龙江哈尔滨１５００７６）　关键词颈肌；椎间盘；细胞凋亡；应力　［中图分类号］Ｒ６８１．５　５　［文献标识码］Ｂ　学科分类代码：３２０．２７４５　文章编码：１００１—８１３１（２００８）０２—０００５—０２　临床流行病学调查显示：长时间低头位造成的颈部异常　木素复染、封片。　应力负荷是颈椎病发生的主要因素之一Ｌ１］。生物力学和病　１．４图像采集：肌组织、椎间盘标本，细胞核染色呈棕黄色　理学研究证实，长时间模拟人低头屈曲姿势可增加家兔颈椎　者为阳性凋亡细胞。图像采集显微镜下，每张肌组织标本以　局部应力负荷，促使椎间盘和椎旁软组织退变　］。肌肉组　阳性细胞集中区域中心为核心，颈间盘分纤维环区和关节软　织异常对颈椎病发病及进展影响的研究刚刚起步Ｌ４］。本实　骨区；均随机取１０个视野，利用图像分析程序测量计数视野　验使家兔处于长期低头位环境，观察颈肌和颈间盘细胞凋亡　中凋亡细胞核个数。在４００倍视野下计算凋亡细胞数占细　情况，探讨家兔颈部结构功能变化，为颈椎病的研究和防治　胞总数的百分比，即细胞凋亡指数（Ａｐｏｐｔｏｔｉｅ，ＡＩ）。　提供支持。　１．５统计学处理：采用统计分析软件ＳＰＳＳ１１．５进行分析，　１材料和方法　所得数值用ｉ±ｓ表示。　１．１实验动物：选用健康成年日本大耳白兔３０只，体重　２结果　２．５～３．Ｏｋｇ，雌雄各半，由中国药品生物制品检定所实验动　光镜下观察，对照组肌组织标本内大部分为蓝色细胞　物中心提供。按体重编号随机分为模型组和对照组，每组　核，凋亡的棕黄色核散在分布于肌纤维细胞核间；模型组于　１５只。在中国中医科学院基础所实验动物中心分笼饲养。　肌纤维内可见集中成串的棕黄色凋亡细胞核。模型组颈间　１．２仪器及试剂：图像采集显微镜ＯＬＹＭＰＵＳ　ＢＸ一５１型　盘纤维环区和关节软骨区凋亡细胞数量偏多，对照组则分布　（日本ＯＬＹＭＰＵＳ公司），图像采集程序为Ｉｍａｇｅ　Ｐｒｏ—Ｐｌｕｓ　散在。　（ＩＰＰ）４．５，由中医科学院骨研所提供；原位细胞凋亡检测试　表１　两组家免颈后肌凋亡细胞比较表　剂盒（ＴＵＮＥＬ试剂盒ＺＫ一８００５，德国罗氏公司）；胃蛋白酶　消化液（ＺＬＩ一９０１３，北京中山生物技术公司）；多聚甲醛（北　京益利精细化学品有限公司）。　１．３实验方法：按文献报道方法　Ｊ，将模型组家兔置于特制　低头位框架改变颈部应力分布，每只家兔低头角度为４５度，　每天１次，每次５小时，松解后笼中自由饲养。对照组不低　头，余处置相同。１２周后将家兔处死，切开颈后部皮肤，在　ｃ３～７棘突旁取皮下肌肉组织约０．５ｃｍ　两块，避免用力钳　经ｔ检验，两组阳性细胞比较，Ｐ＜０．０５具有显著性差　夹，同时取Ｃ４、５颈椎，生理盐水冲洗后放入４％多聚甲醛中　异；凋亡指数比较，Ｐ＜０．Ｏ１具有极显著性差异。　固定及制片（颈椎标本脱钙）；脱蜡后按试剂盒说明操作、苏　［下转第９页］　参考文献　［６］　Ｋａｎｔｒｏｗ　ＳＰ，Ｈａｃｋｍａｎ　ＲＣ，Ｂｏｅｃｋｈ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ　ｐｎｅｍｏｎｉａ　［１］Ｓｔ．Ｇｅｏｒｇｅ　Ｋ，Ｂｏｙｄ　Ｍ　Ｊ，Ｌｉｐｓｏｎ　Ｓ　Ｍ．ｅｔ　ａ１．Ａ　ｍｕｌｔｉｓｉｔｅ　ｔｉｒａｌ　ｃｏｍｐａ．　ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ｃｈａｎｇｉｎｇ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｏｆ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ　ａｆｔｅｒ　ｍａｒｏｗ　ｔｒａｎｓｐｌａｎ－　ｉｒｎｇ　ｔｗｏ　ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ（ＣＭＶ）ｐｐ６５　ａｎｔｉｇｅｎｅｍｉａ　ｔｅｓｔ　ｋｉｔｓ，ｂｉｏｔｅｓｔ　ｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１９９７，６３（８）：１０７９—１０８６．　ＣＭＶ　ｂｒｉｔｅ　ａｎｄ　Ｂａｒｔｅｌｓ／Ａｒｇｅｎｅ　ＣＭＶ　ａｎｔｉｇｅｎｅｍｉａ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉ．　［７］　Ｗａｇｎｅｒ　ＪＥ，Ｅａｐｅｎ　Ｍ，ＭａｃＭｉｌｌａｎ　ＭＬ，ｅｔ　ａ１．Ｕｎｒｅｌａｔｅｄ　ｄｏｎｏｒ　ｂｏｎｅ　ｃｒｅｂｉｏｌ，２０００，３８（４）：１４３０—１４３３．　ｍａｒｒｏｗ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｅｒａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｆａｎｃｏｎｉ　ａｎｅｍｉａ［Ｊ］．　［２］Ｄｅ　ｌａ　Ｈｏｚ　Ｒ　Ｅ，Ｓｔｅｐｈｅｎｓ　Ｇ，Ｓｈｅｒｌｏｃｋ　Ｃ．Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　Ｂｌｏｏｄ，２００７，１０９（５）：２２５６—２２６２．　ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ　ｏｆ　ＣＭＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ａｄｕｌｔ　ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｖｉｒｏｌ，　［８］Ｌ　ｉ　Ｈ，Ｄｕｌｎｍｅｒ　ＪＳ，ＥｓｔｅｓＷｈ，ｅｔ　ａ１．ａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏ．　２００２，２５（Ｓｕｐｐｌ　２）：Ｓ１—１２．　ｖｉｒｕｓ　ｌｏａｄｓ　ｂｙ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｆｏｒ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　［３］Ｔｓｕｔｓｕｉ　Ｙ，Ｋａｗａｓａｋｉ　Ｈ，Ｋｏｓｕｇｉ　ｌ．Ｒｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌａｔｅｎｔ　ｃｙｔｏｍｅｇ－　ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ　ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｃｒｅｂｉｏｌ，２００３，　ａｌｏｖｉｒｕｓ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍｏｕｓｅ　ｂｒａｉｎ　ｃｅｌｌｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｔｏ　４１：１８７—１９１．　ｂｒａｉｎ　ｓｌｉｃｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｖｉｍｌ，２００２，７６（１４）：７２４７—７２５４．　［９］Ｊｅｂｂｉｎｋ　Ｊ，Ｂａｉ　Ｘ，Ｒｏｇｅｒｓ　ＢＢ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｒｅａｌ—ｔｉｍｅＰＣＲ　［４］陆道培．应重视我国骨髓移植的感染问题［Ｊ］．中华医学杂志，　ａｓｓａｙｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｐｓｔｅｉｎ——ｂａｒｒ　ｖｉｒｕｓ　ａｎｄ　Ｃｙ．　１９９９，７９（４）：２４５—２４６．　ｔｏｎｍｇａｌｏｖｉｒｕｓ，Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　Ｔａｑｍａｎ　Ｐｒｏｐｒｏｂｅｓ，ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　［５］　王霞，张蓓，罗长缨，等．儿童异基因造血干细胞移植术后感染　ｂｅａｃｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｍｏｌ　Ｄｉａｇｎ，２００３，５：１５—２０．　的实验观察［Ｊ］．中国小儿血液与肿瘤杂志，２００６，ＩＩ（３）：１０７．　收稿日期：２００８—０１—１０