腹泻患儿粪便中轮状病毒与肠道腺病毒检测结果分析

・２１２・　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｔｒａｎｓｆｕｓ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｊｕｎｅ．２０１５，Ｖｏｌ　１７，Ｎｏ．３　腹泻患儿粪便中轮状病毒与肠道腺病毒检测结果分析　李林　查巍金载璇　沈洁　汪家娟　樊飞　张良祺　卫晓璐　【摘要】　目的　了解本地区婴幼儿腹泻轮状病毒及肠道腺病毒感染情况。方法　采用胶体金免疫层析法检测７　７０５例　腹泻婴幼儿粪便轮状病毒及肠道腺病毒抗原。结果检出轮状病毒抗原阳性１　０９４例，ＲＶ阳性率为１４．２　，其中ＲＶ—Ａｇ和　ＡＤＶ—Ａｇ阳性３３例，占轮状病毒阳性样本的３　。在≤２８　ｄ，２９　ｄ～≤６个月，６个月～３岁，＞３岁四个年龄组中，ＲＶ阳性率　分别为４．７％、８．１　、１９．１　、７．８　。女性患儿轮状病毒感染率高于男性；１ｏ～１２月份ＲＶ感染率明显高于其他月份；ＡＤＶ　感染率则以４～９月份较高，６个月～３岁婴幼儿腺病毒感染率明显高于其他年龄组患儿，女性患儿腺病毒阳性率也高于男　性患儿。结论腺病毒抗原。　轮状病毒和肠道腺病毒感染可以发生在儿童的各个年龄段，建议８，ＪＬ出现腹泻症状时，应检测轮状病毒及　肠道腺病毒　Ｒ４４２．２　【关键词】轮状病毒　【中图分类号】Ｒ３７３．２　腹泻　粪便　【文章编号】１６７１—２５８７（２０１５）０３—０２１２—０３　【文献标识码】Ａ　Ａｎａｌｙｓｅｓ　ｏｆ　Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ　ａｎｄ　Ｅｎｔｅｒｉｃ　Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｆｅｃｅｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｌｄｒｅｎ　ｗｉｔｈ　Ｄｉａｒｒｈｅａ　ＬＩ　Ｌｉｎ，ＺＨＡ　Ｗｅｉ，Ｊ　ｌＮ　Ｚａｉ—ｘｕａｎ，　ｅｔ　ａ１．Ａｎｈｕｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｃｈｉｌｄｒｅｎ　Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｅｆｅｉ　２３００５１　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｕｎｃｏｖｅｒ　ｔｈｅ　ｓｉｔｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｔａｖｉｒｕｓ（ＲＶ）ａｎｄ　ｅｎｔｅｒｉｃ　ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ（ＡＤＶ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｆａｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ　ａｎｄ　ｅｎｔｅｒｉｃ　ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔｏｏｌｓ　ｏｆ　７　７０５　ｉｎｆａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｇｏｌｄ　ｉｍｍｕｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ａｓｓａｙ（ＧＩＣＡ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ　１　０９４　ｃａｓｅｓ　ｗｅｒｅ　ｆｏｕｎｄ　ｔＯ　ｂｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｏｎｌｙ　ＲＶ　ａｎｔｉｇｅｎ．Ｔｈｅ　ｐｏｓｉ—　ｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＲＶ　ｗａｓ　１４．２　．０４，３３　ｃａｓｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｂｏｔｈ　ＲＶ　ａｎｄ　ＡＤＶ，ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ　ｆｏｒ　３％ｏｆ　ｔｈｅ　ＲＶ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｓａｍｐｌｅｓ．　Ｉｎ　ｃｈｉｌｄｒｅｎ　ｗｉｔｈ　ａｇｅｓ　ｏｆ≤２８ｄ，２８ｄ～≤６ｍ，６ｍ￣３ｙ，ａｎｄ＞３ｙ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅｓ　ｗｅｒｅ　４．７　，８．１　，１９．１　ａｎｄ　７．８　，ｒｅ—　ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｓｉｍｉｌａｒ　ｔＯ　ｔｈｅ　ｄｙｎａｍｉｃ　ｔｅｎｄｅｎｃｙ　ｏｆ　ＡＤＶ，ｆｅｍａｌｅｓ　ｈａｄ　ａ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｔｈａｎ　ｍａｌｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒａｎｃｅ　ｏｆ　ＲＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｒｅａｃｈｅｄ　ｉｔｓ　ｐｅａｋ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｏｃｔｏｂｅｒ　ａｎｄ　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ．Ｔｈｅ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ＡＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｐｅａｋｅｄ　ｂｅ　ｔｗｅｅｎ　Ａｐｒｉｌ　ａｎｄ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｙｅａｒ，ｗｉｔｈ　ａ　ｈｉｇｈ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｉｎ　ｉｎｆａｎｔｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ａｇｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　６ｍ　ａｎｄ　３　ｙｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｈｉｌｄｒｅｎ　ｍａｙ　ｓｕｆｆｅｒ　ｆｒｏｍ　ｂｏｔｈ　ｒｏｔａｖｉｒｕｓ　ａｎｄ　ｅｎｔｅｒｉｃ　ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｔ　ａｎｙ　ａｇｅ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｉｎｆａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ　ｔＯ　ＲＶ　ａｎｄ　ＡＤＶ　ｔｅｓｔｓ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ　Ｅｎｔｅｒｉｃ　ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ　Ｄｉａｒｒｈｅａ　Ｓｔｏｏｌｓ　人类轮状病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要　病原之一，其主要感染ｄ，ＪＬ上皮细胞，从而造成组　织损伤，引起腹泻，若不及时治疗或治疗方法不正　确，可能危及生命。为了解本地区腹泻患儿粪便ＲＶ　的感染情况，探讨其发病特点，为临床诊治提供诊　断依据，对本院２０１２年１～１２月门急诊及住院腹泻　女性患Ｊｈ２　５１８例，年龄≤２８　ｄ的３８０例，２９　ｄ～≤　６个月２　７０２例，６个月～３岁４　３９１例，＞３岁２３２　例。诊断主要依据临床症状和体征，大便性状多为　黄稀水样、蛋花汤样或稀糊状，镜检多数未见明显　异常，部分可检出脂肪球，少数可见少量白细胞。　２试剂和方法　患儿粪便标本的轮状病毒及肠道腺病毒抗原的检　测结果进行分析。　材料与方法　２．１试剂：轮状病毒、腺病毒抗原检测试剂盒由艾　博生物医药（杭州）有限公司生产，采用双抗体夹心　法及免疫层析分析技术，快速检测婴幼儿粪便中的　轮状病毒、腺病毒抗原。试剂含有被事先固定于膜　１材料本院２０１２年１～１２月门急诊及住院腹泻　上检测Ｒ区的轮状病毒抗体、Ａ区的腺病毒抗体、　包被在聚酯膜上的轮状病毒抗体乳胶和腺病毒抗　体乳胶混合物。检测时，稀释过的粪便样本滴人试　剂加样区内，样本在毛细效应下向上层析。如样本　中含有相应的待测物质时，在检测Ｒ区出现一蓝色　患儿粪便标本共７　７０５份，其中男性患儿５　１８７例，　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１—２５８７．２０１５．０３．００６　作者单位：２３００５１合肥，安徽省立儿童医院　作者简介：李林（１９６６一），男，安徽合肥人，主管检验师，学士，　主要从事儿科临床生化及免疫检验工作，（Ｅ—ｍａｉｌ）ｌｉｌｉｎ１０６８＠１６３．　条带，表示轮状病毒阳性；或检测Ａ区出现一红色　条带，表示腺病毒阳性。　临床输血与检验２０１５年６月第１７卷第３期　２．２方法：用采样棒取适量粪便样品加入装有稀　释缓冲液的收集器中，将盖子旋回收集器，并充分　摇匀。取出试剂，置于干净平坦的台面上，折断已收　集粪便标本的收集器尖端，弃去开始的２滴后，用　收集器垂直滴加２滴无空气泡的样品稀释液于加　样孔内。测试结果在１０￣２０　ｍｉｎ内读取，２０　ｍｉｎ后　判断结果无效。　２．３结果判断：控制区（Ｃ）出现蓝色条带，在检测　Ｒ区出现一蓝色条带，表明轮状病毒阳性；或检测　Ａ区出现一红色条带，表示腺病毒阳性。Ｃ区和Ａ　区同时出现条带，表示轮状病毒和腺病毒抗原都是　阳性，仅质控区出现一蓝色条带为阴性结果，质控　区未出现蓝色条带为无效，应重新测试。　３　统计学处理应用ＳＰＳＳ　１３．０统计软件，采用　卡方检验。　结　果　１腹泻患儿粪便轮状病毒和肠道腺病毒抗原检测　结果　７　７０５例腹泻患儿的粪便标本中，轮状病毒　抗原阳性１　０９４例，ＲＶ阳性率１４．２　，其中ＲＶ—Ａｇ　和ＡＤＶ—Ａｇ阳性３３例，占阳性样本的３％。轮状病　毒抗原阳性样本中男性７０１例，女性３９３例；肠道腺　病毒抗原阳性１８０例，ＡＤＶ阳性率２．３　，肠道腺　病毒抗原阳性样本中男性１０８例，女性７２例。　将年龄≤２８　ｄ新生儿组与２９　ｄ～≤６个月婴　幼儿组比较，Ｐ一０．０２３，差异有统计学意义；与６个　月～３岁婴幼儿组比较，Ｐ（０．００１，差异有统计学　意义；与＞３岁幼儿组比较，Ｐ＝０．１５６，差异无统计　学意义；６个月～３岁婴幼儿组与其他两组比较，Ｐ　值均小于０．００１，差异有统计学意义。结果显示６个　月～３岁婴幼儿组为轮状病毒感染的高发期，占阳　性病例的７６．６％，２９　ｄ～≤６个月婴幼儿组占阳性　病例的２Ｏ％，＞３岁幼儿组感染率相对较低，新生　儿组感染率最低。见表１。　将年龄≤２８　ｄ新生儿组与２９　ｄ～≤６　Ｉ－月婴　幼儿组比较，Ｐ一０．０５５，与＞３岁幼儿组比较，Ｐ一　０．５６１，差异无统计学意义；与６个月～３岁婴幼儿　组比较，Ｐ＜０．００１，差异有统计学意义；２９　ｄ～≤６　个月婴幼儿组与６个月～３岁婴幼儿组比较，Ｐ＜　０．００１，差异有统计学意义；与＞３岁幼儿组比较，Ｐ　一０．５７７，差异无统计学意义；６个月～３岁婴幼儿　组与＞３岁幼儿组比较，Ｐ一０．０３３，差异有统计学　意义。结果显示腺病毒感染高发年龄段为６个月～　・２１３・　３岁婴幼儿组，占阳性病例的７４．４　，其次是２９　ｄ～　≤６个月婴幼儿组，占阳性病例的２３．８　，与轮状　病毒相似。见表２。　表１不同年龄组腹泻患儿粪便轮状病毒抗原检测结果　表２不同年龄组腹泻患儿粪便肠道腺病毒抗原检测结果　２不同时间腹泻患儿粪便轮状病毒抗原和腺病毒　抗原检测结果　不同季节患儿轮状病毒抗原检测　结果，一季度与二季度阳性率相比，Ｐ一０．０１２；二　季度与三季度比较，Ｐ：＝：０．０３８，差异均有统计学意　义；一季度与三季度相比，Ｐ一１．０００，差异无统计　学意义；一季度与四季度阳性率相比，Ｐ＜０．００１，　四季度与二季度和三季度相比，尸值均＜０．００１，差　异有统计学意义。结果显示秋冬季为轮状病毒感染　的高发季节。见表３。　表３不同时间腹泻患儿粪便轮状病毒抗原检测结果　不同季节患儿腺病毒抗原检测结果显示，一季　度与二季度阳性率相比，Ｐ％０．００１；二季度与四季　度比较，Ｐ（０．００１；差异均有统计学意义；一季度　与三季度比较，Ｐ一０．０９１；一季度与四季度比较，Ｐ　一０．６３２；二季度与三季度比较，Ｐ一０．２５５；三季度　与四季度比较，Ｐ一０．１６２，差异均无统计学意义。　结果显示，春夏季节（４～９月）腺病毒感染率较高。　见表４。　女性患儿轮状病毒及肠道腺病毒阳性率均高　・２１４・　于男性患儿，Ｐ值分别为０．０１５和０．０３７，差异有统　计学意义。　表４不同时间腹泻患儿粪便肠道腺病毒抗原检测结果　讨　论　ｄ，Ｊｈ腹泻病是一组多病原引起的消化道疾病，　腹泻为第三世界国家ｓ｜，ＪＬ首位多发病与死因。轮状　病毒引起的婴幼儿急性腹泻常在秋冬季造成大范　围流行，严重影响了儿童的健康发育，甚至危及生　命。腺病毒能引起多种疾病，４Ｏ、４１型能引起胃肠　炎，在幼儿肠道病毒感染中，仅次于轮状病毒　］，　春夏季节（４４９月）腺病毒感染率较高０　。　本次分析的７　７０５例腹泻患儿粪便中轮状病毒　抗原检出率是１４．２％，与国内叶惠英报道阳性率　３０．９％　］、梁鹏报道阳性率３１．６ｌ６　、叶卉初报道　阳性率３８．１％　］、孙小红报道阳性率３１．６　相　比，明显较低，除区域性差异以及轮状病毒疫苗的　使用外，还可能与我院近年来临床医师重视粪便检　查，已经把轮状病毒和腺病毒检测作为腹泻患儿的　常规检验有关，有待进一步观察研究。轮状病毒阳　性检出率以６个月～３岁组阳性率最高，阳性率是　１９．１　，占阳性病例的７６．６％。说明轮状病毒引起　的婴幼儿腹泻多发生在６个月～３岁的婴幼儿，６　个月以下婴儿和３岁以上的幼儿相对较低；本组观　察到新生儿也有一定比例的感染率，粪便轮状病毒　抗原阳性率达到４．７　，应当引起注意并加强防控，　新生儿病区更应加强管理，防止院内感染发生。女　性患儿轮状病毒阳性率为１５．６　，高于男性患儿的　１３．５％。腺病毒抗原阳性检出率为２．３　，仅次于轮　状病毒，阳性检出率以６个月～３岁组阳性率最高，　阳性率是３．１　，占阳性病例的７４．４　；高发于４４９　月；女性患儿腺病毒阳性率为２．９　，高于男性患儿　的２．１　。　≤６个月的婴儿有来自母体的特异性ＩｇＧ抗　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｔｒａｎｓｆｕｓ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｊｕｎｅ．２０１５，Ｖｏｌ　１７，Ｎｏ．３　体和乳汁中分泌的ＩｇＡ抗体，可获得部分保护作　用；而３岁以上的幼儿免疫系统发育逐渐完善，可　能因为之前曾有感染而产生相应的抗体，也具有一　定的保护作用，所以感染率相对较低。６个月～３岁　的婴幼儿，由于来自母体的特异性ＩｇＧ抗体和乳汁　中分泌的ＩｇＡ抗体逐渐减少，消化道防御功能和免　疫系统发育尚不健全，所以感染率较高。　轮状病毒是引起婴幼儿严重腹泻的最主要病　原体之一，全年都有发病，本地区以每年１０～１２月　为感染高发季节，腺病毒则是每年４４　９月阳性率　较高；６个月～３岁的婴幼儿是轮状病毒和腺病毒　感染的高危人群。轮状病毒感染主要经粪口途径，　应注意腹泻患儿的隔离，尤其是幼儿集中的幼托机　构更应重视卫生消毒，做好预防工作；在感染高发　季节可以考虑口服减毒重组活疫苗进行预防。建议　／｜，ＪＬ出现腹泻症状时，除查大便常规外，还需检测　轮状病毒及腺病毒抗原，以帮助确定病原体，指导　合理选用药物，对症治疗，避免抗生素的滥用。　参　考　文　献　１　中华人民共和国卫生部医政司．全国临床检验操作规　程［Ｍ］．东南大学出版社，２００６：１２　ｌ９．５１．６３６　６３８．　２郑建新，杨慧，傅启华．腹泻患儿轮状病毒感染情况调查　［Ｊ］．检验医学，２０１０，８（２５）：６５２　６５４．　３王建阳，沈晓晴，李梦磊，等．河南省婴幼儿轮状病毒腹　泻病原研究［Ｊ］．现代检验医学杂志，２００９，２３（５）：４６—　４８．　４林谦．婴幼儿肠道腺病毒和轮状病毒感染的调查与研究　［Ｊ］．南京医科大学报，２００５，２５（１１）：８５１—８５２．　５　叶惠英．婴幼儿轮状病毒感染６　０６８例分析ＥＪ］．浙江预　防医学，２００９，２１（１１）：６０．６４．　６梁鹏．小儿急性腹泻粪便中Ａ群轮状病毒检测与分析　ＥＪ］．现代医药卫生，２００７，２３（２４）：３６８４．　７　叶卉初，刘玉华．２０１０—２０１２年北京地区儿童轮状病毒　腹泻的流行病学研究ＥＪ］．中华实验和临床病毒学杂志，　２０ｌ２，２６（６）：４３２　４３４．　８孙小红，林祥宏，徐元宏，等．３１０例婴幼儿腹泻轮状病　毒检测及流行病学分析［Ｊ］．安徽医药，２０１０，１４（１２）：　ｌ４】９—１４２０．　（收稿日期：２０１４—１１　１５）　（本文编辑：王虹）