维普资讯 http://www.cqvip.com ２００８年第４期 云南农业科技 Ｙｕｎｎａｎ Ｎｏｎｃｅ Ｋｅｊｉ ３９ 舅熙 绝寓掰 蠛黎魏 侯朝祥，毕艳，赵培方，王炎炎 ６６１６００） ｆ云南省农业科学院甘蔗研究所，云南 开远川山紫红薯是近年来从日本川崎农场引进的特色 续生长，幼叶展开变绿，再培养５ ｄ可见茎尖小苗，并将其 红薯品种。因薯皮紫红近黑色，肉色紫红而赢得黑红芋 之称。川山紫ｔＺ（甘）薯 ｏｍｏｅｓ ６ ｓ）为番薯属植物，结 薯早，多而集中。该品种熟食香甜面沙、浓郁芳香、食味 好、营养丰富，深受广大消费者的青睐。其富含硒元素 和花青素，具有保护肝脏和降低血清转氨酶的作用，还 具有抗癌、美容和强身功效，长期食用可提高人体免疫 力，抗疲劳，防衰老，具有特殊的保健功效，在国际上被 誉为“绿色保健食品”。同时紫色红薯还富含紫色素和 生物酮，是加工提取天然色素，用作糕点、饮料配色或 作化妆品（如唇膏）的好原料；也是提取生物酮，用作医 药的优质原料。因此，川山紫红薯种植具有广阔的开发 应用前景。但川山紫红薯抗病力一般，易感染根腐病 （ｒｏｏｔ ｒｏｔ）、黑斑病（ｂｌａｃｋ ｒｏｔ），并且此作物无性繁殖，经 过多年种植后，容易积累病毒，影响生长，导致产量下 降。因此，利用健康种苗作种成为了川山紫红薯种植开 发可持续发展的必然要求。据孙光泽等研究报道，脱毒 甘薯不但生理代谢旺盛，缓苗快，长势旺，加工品质明 显提高，而且增产潜力大，与未脱毒甘薯相比，可增产 ２０％～５０％，甚至更高。川山紫红薯作为甘薯中的一 种，利用健康种苗作种可以提高种植效益，并将惠及广 大种植户和开发企业。为了能够向生产提供大量优质的 健康种苗，对川山紫红薯脱毒健康种苗生产技术进行了 探索，现将重要技术环节总结如下，以供生产利用。 １脱毒培养 １．１无菌外植体的获得 选取川山紫红薯苗顶部１～２ ｃｍ长的茎尖。先用 ７０％酒精浸泡２０ Ｓ，再用０．１％升汞消毒５ ｒａｉｎ，无菌水冲 洗４～５次，在超净工作台上解剖镜下剥离茎尖，获得长 ０．２～０．５ ｍｍ（带１～２个叶原基）的茎尖分生组织。 １．２茎尖分生组织培养 将剥离获得的茎尖分生组织接种在ＭＳ＋３％蔗糖 ＋０．７％琼脂＋１ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ培养基上，静置于温度为２６～ ２８℃、光照强度为２ ５００～３ ５００ ｌｕｘ的条件下，每天进行 １６ ｈ光照培养。培养１０～１５ ｄ后，切口基部膨大，茎尖继 收稿日期：２００８—０３—０３ 转入ＭＳ＋３％蔗Ｎ＋０．７％琼脂培养基上，进行每天１４ ｈ光照 培养，５０ ｄ后即可获得茎尖试管苗。待苗生长至８ ｃｎ 高，含 有６～８片叶时移至营养钵内进行病毒检测。 ２脱毒鉴定 脱毒鉴定首先采取目测法，淘汰弱苗和显症苗，然 后参照谢逸萍等报道的检测方法，即采用ＮＣＭ—ＥＬＩＳＡ 法（血清学法）鉴定川山紫红薯病毒。每试管苗取基部２ 片叶装入塑料袋中，加入１ ｍｌ ＴＢＳ—ＤＩＥＣＡ提取缓冲液， 轻轻碾压，使样品与组织液混匀，４℃下静置约１ ｈ，取 上清液点样在准备好的纤维素样膜上，进行斑点 酶联免疫吸附试验，然后冲洗、显色，阳性反应为蓝紫 色，表明没有脱毒；阴性反应为无色，说明已脱去病毒。 ３脱毒苗筛选增殖 ３．１优良株系评价筛选 川山紫红薯在脱毒培养过程中，由于受激素等外 界条件的影响，会出现一定的芽变几率，茎尖苗株系间 在形态和产量方面常常存在较大差异。因此，经病毒检 测确认的脱毒苗在扩繁之前，必须进行优良株系评价 筛选，淘汰变异畸形株系，保留优良株系。评选方法：以 普通未脱毒材料为对照，将脱毒苗株系以每株系８～１５ 株为基数，栽种到防虫网室内，进行形态、长势、产量等 方面的观察评定，筛选出既符合品种特性又高产稳产 的优良株系，进行繁殖。 ３．２脱毒试管苗增殖 利用茎尖分生组织培养获得的脱毒苗，经过评价 筛选得到少量优质株系，不能满足生产需求，要想获得 大田生产利用的充足脱毒苗，还需进行室内增殖扩繁。 川山紫红薯脱毒茎尖苗的增殖，采用试管苗单节快繁 方式来完成。即在无菌条件下，将培养获得的脱毒苗茎 尖１～３ ｃｍ，切成单节接种到Ｍｓ＋３％蔗糖＋０．７％琼脂培 养基上，静置在温度２６～２８℃，光照强度２ ５００～３ ５００ ｌｕｘ 下，进行每天１４ ｈ光照培养，经１８～２５ ｄ培养，可得到根 长为１２．５～２１．６ ｃｍ，根数为２～５条，节数为１０个左右的 完整植株。按此培养程序，进行不断转接培养，即可达 到增殖扩繁目的，同时每次切割后留有芽的母体，摆放 于相同培养条件下，经１０ ｄ以上的培养又可长成完整 维普资讯 http://www.cqvip.com
云南农业斟技 ￣ｕｎｎａｎ Ｎｏｎｇｙｅ Ｋｅｊｉ ２００８年第４期 植株，并且植株健壮，根系更发达，易移栽成活。为提高 ４．３假植 繁殖速率，还可以在培养基中添加适量ＧＡ 。 先用自来水将培养基清洗干净，修剪弃去枯黄叶， ４脱毒苗假植移栽 保留根长５～８ ｃｍ；再用０．１％高锰酸钾浸泡２０ Ｓ，进行 消毒处理；然后按５ ｃｍ ｘ ６ ｃｍ株行距栽植于苗床上，浇 增殖获得大批量的脱毒苗，要想用于生产，还必须 足定根水，建盖小拱棚，并通过揭膜通风透气、浇水等 为其创造一个适宜的过渡环境，以适应外界环境，这就 措施控制拱棚温度。 得进行脱毒苗的假植。经假植移栽，培育生产出的川山 ４．４假植苗管理 紫红薯脱毒健康苗，在此称为原原种。 为提高川山紫红薯脱毒试管苗假植成活率，需为 ４．１假植要求 其创造一个适宜的过渡环境，因此，在假植管理的阶 在假植过程中，为了避免川山紫红薯脱毒试管苗 段，要注意以下几点：（１）勤浇水，常通风，保证温度既 受到病虫害的再侵染和提高移栽成活率，对其假植条 不能低于１０℃，也不能高于３０℃；（２）加强病害防治， 件有严格要求：…１假植必须在防虫网棚内进行，而且 每隔２ ｄ喷施１次０．３％多菌灵；（３）适时施肥，满足脱毒 对防虫网有一定要求，一般所用的网眼必须在４０目以 苗生长所需的营养，假植７ ｄ后，可用０．１％的尿素喷施， 上，保证蚜虫不能通过，减少蚜虫传播病毒的机会；（２） 随着苗的成活，可以逐渐加大喷施浓度，待苗生长至２０ 用作假植的地块必须是无病原土壤，最好选用多年未 ｃｍ高时，应少施氮肥，重施磷、钾肥；（４）加强温湿度控 栽种过甘薯的地块；（３）假植前须对周围环境喷洒杀虫 制，防止茎叶快速生长；（５）加强蚜虫防治，每星期喷 剂，防治蚜虫；（４）假植不宜在高温干燥的气候条件下 洒１次１．５％乐果粉剂防治蚜虫。 进行，应选择在阴天或傍晚假植；（５）由于植株较幼嫩， 叶片宽大，蒸腾速率快，易失水萎焉，假植前不需要进 ５脱毒健康种苗田间繁殖 行驯化炼苗。 获得一定量的原原种后，由于数量有限，还需进一 ４．２苗床准备 步田间扩繁，升级为原种（原种即利用原原种苗在具备一 以土：有机质＝３：１为苗床基质，并拌人一定量的杀 定隔离条件下，在无病原的田块生产的种苗）。获得原种 虫剂进行杀虫处理。为方便操作，一般按长４ ｍ，宽１．２ ｍ 后，为加速良种推广应用，再将原种种植在地势高，土质 做苗床。准备好苗床后，在假植移栽前１ ｄ，用０＿３％多菌 较肥沃疏松，２～３年内没有种过薯类作物的轮作地进行 灵浇淋苗床，进行消毒处理。 扩繁后，得到充足的种苗，即可大批量提供生产利用。 （上接第３４页） 各龄食桑时降低０．５～１℃，以减少眠蚕体力消耗，利于 ３．２眠蚕止桑 蚕儿脱皮。蚕在眠中光线不能太强，蚕室要适当遮黑。 眠蚕，蚕农俗称为蚕睡觉。蚕儿“站”在桑叶上不吃 也不动，在这段时间里蚕儿蜕旧皮，换新衣。待蚕座中 ４调箔处理 眠蚕数量达到９０％以上，就可以撒焦糠止桑。３份焦糠 蚕室中上下温差大概有０．５℃左右，如果蚕箔位置 中掺１份石灰粉，既可以干燥蚕座，利于蚕蜕皮，又可以 长期不动，就容易造成箔与箔之间发育不齐，增加眠起 起到杀灭病原，防止交叉感染的作用。蚕眠后不能随意 处理的难度。因此在饲养小蚕时，每天早上给完桑后应 地翻动蚕座，以防不蜕皮蚕的发生。 调一次箔。调箔时可以同排上下调，也可以对排上下 ３．３迟饷食 调。 蚕是先吃先长，不吃就不长。所以蚕要养得整齐， 饷食一定不能过早，饷食时间要适当偏迟。脱了皮的蚕 ５提青分批，让发育慢的蚕儿尽快发育 叫起蚕，起蚕头大体长，皮松弛，色青灰，晃头摆脑四处 提青分批，就是把发育不同的蚕儿分离出来分批 找东西吃。待到蚕座中起蚕达９５％以上就可以给桑饷 饲养，以便于管理操作。只要掌握好加网时间，就能很 食了。起蚕的口器较嫩，消化力不强，饷食给桑不能太 轻松地把少量发育较迟的蚕儿从蚕座中分出来。提青 多，应喂鲜嫩的新叶，２龄起蚕可以喂１龄蚕叶。有的蚕 处理一般选择蚕止桑后不久进行，观察到有少量的蚕 农见蚕座中有部分的起蚕，就迫不及待的给桑叶，这是 儿在左右爬动，不能人眠，此时正是加网的好时机，加 造成蚕儿群体发育不齐的重要原因之一。 网，给少量的桑叶。０．５ ｈ左右再来看，还想吃桑叶的青 ３．４眠中温湿度及光线 蚕都爬上了网。提网，由于提出来的青蚕数量较少，可 Ｉ，２龄蚕要求的温度大约在２６～２８￣Ｃ，干湿差１．５～ 以几箔并一箔，整理蚕座后把它插在蚕架最高处饲养， ２￣Ｃ；３龄蚕２５～２６ ，干湿差２～２．５ 。蚕在眠中温度比 让发育慢的蚕儿赶上来。